Цитологическое гистологическое иммуногистохимическое исследование

Иммуногистохимия: что это такое, где сделать, цена

Цитологическое гистологическое иммуногистохимическое исследование

Иммуногистохимия – это специальный анализ для определения ракового заболевания. С его помощью находят антигены, выделяемые определённым видом раковых клеток. Вдобавок с помощью иммуногистохимии прослеживается реакция антигенов на лечение. Анализ составляет основу диагностики и терапии в современной онкологии.

Как работает метод

В названии метода соединились три отрасли – иммунология, гистология и химия. Для анализа используют химические вещества. Реактивы насыщены антителами, находящими раковые антигены. Антитело – это белок, его структура притягивает антиген. Белок окрашивают ферментами, красителями, которые проявляются при положительной реакции.

Теоретические основы иммуногистохимии заложены в 40-е годы 20-го века. С помощью флуоресценции находили антигены в замороженных клетках. Затем стали использовать окрашенные ферментами антитела. Установили соответствия цветовой реакции и типа раковых клеток. Также определили гормоны и их рецепторы.

Практическое применение методов ИГХ:

  • Определение типа клеток;
  • Изучение секреторных внутриклеточных процессов и особенностей клеточного синтеза;
  • Определение гормонов и гормональных рецепторов.

Клетки под микроскопом после иммуногистохимии

Виды:

  • Прямой метод – маркированные антитела соединяются с искомыми антигенами.
  • Непрямой, «антиген-антитело» – неотмеченные антитела находят антигены, потом их соединения обнаруживают вторичные отмеченные антитела.

Цвет реакции показывает статус опухоли.

Цель метода

Иммуногистохимическое исследование отвечает на три вопроса.

Что это такое

Специфический анализ помогает выяснить строение раковой клетки и идентифицировать по гистологическим признакам, к какому классу относится новообразование.

Где оно находится

Если точная локализация опухоли неизвестна, с помощью иммуногистохимии находят расположение по метастазу.

Как это лечить

С помощью анализа видна реакция антигенов на вещества препаратов химиотерапии. Так удаётся оценить, окажется ли действенным лечение указанным способом.

Установить, к каким препаратам рак устойчив, можно прежде, чем химия попадет в организм человека. Таким образом, пациента избавляют от лишней интоксикации, а сразу назначают лекарство, о действенности которого заведомо известно.

Если рак устойчив к химиотерапии, предстоит выбрать другой метод лечения.

Это помогает в лечении эстрогенозависимых опухолей при раке молочной железы.

Сложная структура железистых клеток включает признаки новообразований различной степени агрессивности. Эти опухоли бывают устойчивыми к химиотерапии и гормонам. Насколько агрессивно развивается опухоль, возможно установить по маркеру пролиферации в иммуногистохимическом тесте.

Как проходит процедура

На иммуногистохимический анализ попадает образец ткани, взятый с помощью биопсии. Это способ забора биоматериала с помощью тонкой иглы. Её вводят в тело пациента и шприц-системой втягивают ткань опухоли. Образец проходит подготовку:

  • Фиксация с помощью парафина.
  • Изготовление срезов.
  • Распределение срезов по стеклам.
  • Обработка образцов антителами и красителями.

Перед исследованием биоматериал хранится в формалине. Это позволяет использовать единственный образец долгое время, чтобы не травмировать пациента. Биопсия бывает болезненна, если опухоли расположены в труднодоступных местах.

Злокачественные образования в головном мозге по возможности удаляют оперативно, на анализ попадает непосредственно опухоль. Важно сохранить материал, так как опухоли бывают размером до 1 см. По результатам теста строится программа лечения.

Впрочем, в этом случае иммуногистохимия обладает преимуществом.

Работа с материалом биопсии

Положительные и отрицательные стороны

Преимущества метода:

  • Требуется минимум биоматериала и реактивов;
  • Определяет рак на ранней стадии;
  • Быстрый результат;
  • Точность и достоверность.

Дополнительное преимущество – в возможности трехмерного моделирования. Ответная реакция на антитела видна через три часа. Окончательное заключение дается через 7-10 дней.

По истечении этого времени будет точно установлен тип рака и стадия заболевания, а также его первичный очаг. Изменение цвета маркеров обычно не имеет разночтений при постановке диагноза.

На итоговом бланке прописывают расшифровку результатов.

Достоверность зависит от метода окрашивания образца реактивами. Это делается автоматически и вручную. При ручном методе не исключён человеческий фактор, ошибки лаборантов.

Лечащий врач подскажет, в какую лабораторию обратиться. Пациент может самостоятельно поинтересоваться, как проводится анализ в конкретном учреждении.

Для достоверности результата он может проводиться повторно или в двух лабораториях.

Погрешность в результате возникает по вине пациента. Перед биопсией следует отказаться от гормональных препаратов и других лекарств, от физических нагрузок, придерживаться диеты. Внешние факторы влияют на результаты.

Применение метода в диагностике

Показания к анализу:

  • Патологии репродуктивной системы, бесплодие;
  • Активный опухолевый рост любой локализации.

Противопоказаний к анализу нет. Порой невозможно получить биоматериал для исследования из-за расположения опухоли.

Иммуногистохимия эндометрия – важное исследование для нахождения причин бесплодия. Его цель – найти антиспермальные клетки, препятствующие оплодотворению.

Причиной бесплодия становится нечувствительность эндометрия к гормонам во время овуляции. При этом показатели гормонального фона в норме, антиспермальных тел нет.

Иммуногистохимическая диагностика выявляет, что проблема в рецепторах эндометрия.

Трудно поддаются диагностике тимомы. Их деление на злокачественные и доброкачественные условно. Всё зависит от конкретного случая. Статус опухоли вилочковой железы, тимуса показывает исследование на антитела.

ИГХ при раке прямой кишки применяется, чтобы установить эпителиальный или эндокринный характер опухоли, наследственный фактор и прогноз. Методика определяет первичное ли заболевание и метастазы.

Расшифровка результатов основана на показателе степени злокачественности. Чем он выше, тем менее благоприятный прогноз. Патология – 85% содержания маркера, означает последнюю стадию заболевания с метастазами. Менее 10% – норма, благополучный исход лечения.

Другие маркерные методы

Онкологический диагноз всё же редко ставят по результатам единственного исследования.

Гистологический

Второй информативный анализ – гистология. Метод отличается от иммуногистохимии тем, что даёт представление только о клеточном строении. Гистологическим способом выделяют в одном материале несколько различных структур, к примеру, аденокарциномы. Злокачественное образование формируется из железистой ткани, которое выделяет жидкость.

Исходя из типа жидкости, выделяют серозную и слизисто-секреторную. Клетки аденокарцином располагаются фолликулярно или папиллярно. Опухоль бывает твердой или с включениями цист, и уже классифицируется как цистаденокарцинома.

Об этих характеристиках узнают по результатам гистологического исследования и корректируют лечение под конкретный тип опухоли.

Технология такая же, как при иммуногистохимии. Берут материал с помощью биопсии, покрывают парафином и разрезают образец на тонкие пластины. Готовые препараты также окрашивают, после чего патоморфолог изучает их под микроскопом.

Недостатки гистологического исследования – длительные сроки ожидания результата планового анализа, 10-14 дней. Срочный анализ делают за 30 мин.

Окрашенный препарат для изучения

Метод МГМ

Ещё один анализ, в основе которого лежит реакция на маркеры – молекулярно-генетический. Помогает установить отклонения в ДНК злокачественной опухоли, влияющие на её метастатическую и инвазивную активность, а также наличие наследственной предрасположенности или спорадической, спонтанной природы образования.

Гистология и иммуногистохимия – два основных метода постановки диагноза при раке, подтверждающие друг друга. Разница в результатах редка, так как иммуногистохимия включает исследование клеточного строения.

Часто после гистологического исследования лимфоузла пациента дополнительно направляют на иммуногистохимию. Под микроскопом материал изучает эксперт, который может что-то упустить. Либо структуру сложно идентифицировать. Метод ИГХ – помощь в спорной ситуации.

Лаборатории и стоимость

В России есть лаборатории, где можно сделать тест на иммуногистохимию.

Лаборатория компании «ЮНИМ», Инновационный центр Сколково, Москва – 28300 р. любой сложности, 19000 при раке молочной железы, срок 3 дня.

Лаборатория «Мелайн-Сервис», Москва:

  • 6560 р. анализ на 1 антитело;
  • 15980 р. анализ мягкотканных опухолей 6-10 антител;
  • 27350 р. сложный анализ на 11-14 антител;
  • 12620 р. – стандартное исследование молочной, предстательной железы, определение статуса эндометрия, 2-5 антител.

Центр молекулярной диагностики в Москве и с филиалами в регионах РФ:

  • 5170 р. – 1 антитело;
  • 12500 р. – 5 антител;
  • 24000 р. – 10 антител.

Стоимость зависит от сложности исследования и вида рака.

Источник: https://onko.guru/medic/immunogistohimiya.html

Цитологическое гистологическое иммуногистохимическое исследование

Цитологическое гистологическое иммуногистохимическое исследование

Под данным исследованием подразумевается изучение образца тканей под микроскопом. Их получают при помощи биопсии и предварительно обрабатывают специфическими антителами.

Онкологические заболевания давно находятся в поле зрения врачей и ученых. В ходе многочисленных исследований было установлено, что злокачественные клетки в процессе жизнедеятельности продуцируют специфические белки, которые называют антигенами.

Они связываются с антителами, именно на этом основано иммуногистохимическое исследование, когда ткань пациента, взятая для изучения, после обработки тщательно изучается при помощи микроскопии.

Когда антитела взаимодействуют с раковыми клетками, то можно наблюдать явление флуоресценции. Это дает основания практически на 100 % быть уверенным, что имеет место онкология.

Сейчас уже разработаны и активно внедрены в медицинскую практику антитела практически ко всем новообразованиям.

Интерпретация результатов анализа

Исследовать при помощи этого метода можно практически все ткани человеческого организма, но чаще всего такой анализ назначают при подозрении на онкологию.

Исследование применяют:

  1. Для определения первичных новообразований.
  2. Для выявления метастазов.
  3. Данный анализ помогает определить прогноз развития и протекания патологии.
  4. Анализ служит одним из методов исследования рецепторов к ряду гормонов.
  5. ИГХ-исследование позволяет обнаружить микроорганизмы.
  6. Метод исследования применяют для выяснения чувствительности раковых клеток к химиотерапии и радиотерапии.

Преимуществом такого метода исследования является также отсутствие противопоказаний. Сложность может возникнуть только в том случае, если раковое образование расположено в труднодоступном месте.

Иммуногистохимическое исследование проводится в несколько этапов, первым из них является сбор биологического материала. Его получают путем биопсии или изъятия материала во время проведения операции.

Кусочек ткани помещают в формалин и направляют в лабораторию, где его подвергают изменениям:

  1. Материал обезжиривают специальными составами и заливают парафином. В таком состоянии он может храниться практически вечно, поэтому при необходимости исследование можно повторять.
  2. На следующем этапе получают тончайшие срезы — проводят микротомирование. Их размещают на специальных стеклах.
  3. Приготовленные срезы обрабатывают растворами антител определенной концентрации. Использовать для обработки могут составы, содержащие разное количество антител. Какие из них вступят во взаимодействие с раковыми клетками, будет зависеть от разновидности опухоли.

Результаты исследования будут готовы только через одну или две недели.

Необходимо иметь в виду, что исследовать подготовленные образцы тканей имеет право только врач, имеющий сертификат, подтверждающий специальную подготовку по проведению анализов по методу ИГХ.

В заключении должно быть указано:

  1. Показатели антител, к которым определена тропность исследуемой ткани.
  2. Указывается разновидность раковых клеток и их количество.
  3. Указываются выявленные антигены, которые помогают установить вид онкологии.

По результатам исследования нельзя ставить окончательный диагноз. Врач-онколог имеет право это сделать только после получения интерпретации всех диагностических процедур.

Таким образом, можно сделать вывод, что эффективно иммуногистохимическое исследование при раке молочной или других желез и других видах онкологии. Анализ дает исчерпывающую информацию и позволяет распознать начинающийся патологический процесс на клеточном уровне.

С помощью этого метода можно исследовать любые ткани. Главным показанием к проведению является подозрение на опухолевый процесс.

К данному методу исследований нет противопоказаний. Его проведение невозможно лишь в том случае, если нет возможности получить биопсийный материал. 

Возможности исследования

Иммуногистохимическое исследование при раке позволяет:

  • Распознать новообразование и определить его разновидность.
  • Выяснить распространенность первичного очага по организму.
  • При взятии биологического материала из вторичных очагов можно определить источник распространения метастазов.
  • Исследование позволяет оценить эффективность терапии.
  • При помощи анализа можно выяснить, на какой стадии развития находится раковая опухоль.
  • Иммуногистохимическое исследование позволяет также выяснить скорость роста новообразований.

Данный метод исследования считается более информативным по сравнению с обычным гистологическим. Если использовать оба метода исследования, то можно получить полнейшую картину, поэтому на практике чаще всего врачи так и поступают.

Как проводится иммуногистохимическое исследование

Результаты исследования становятся известны через 7 дней (при стандартном исследовании – «малая панель») или через 15 (расширенное исследование – «большая панель»).

Иммуногистохимическое исследование при раке молочной железы

Такой анализ просто незаменим, если есть подозрение на наличие раковых клеток в груди. Обязательно определение количества рецепторов эстрогена и прогестерона. При их повышении активизируется процесс роста злокачественных клеток.

ИГХ-исследование позволяет не только распознать онкологическое заболевание, но и определить его стадию. При помощи исследования врачи выясняют, показана ли гормональная терапия.

Опухоли, имеющие большую концентрацию гормонов, чаще всего вполне эффективно лечатся антигормональными препаратами.

Во время проведения анализа обязательно определяют показатель Ki-67, он помогает определить злокачественность процесса. Если иммуногистохимическое исследование молочной железы показывает Ki-67 до 15 %, то исход заболевания считается благоприятным.

Если показатель доходит до 30 %, то без химиотерапии не обойтись, потому что опухоль растет довольно быстро. Отметка в 90 % чаще всего свидетельствует о неизбежности летального исхода.

Данный анализ назначается не только при подозрении на онкологию груди, но еще он оказывается довольно информативным, если:

  • Имеется бесплодие.
  • Обнаружены злокачественные образования матки.
  • Наблюдаются патологические изменения в репродуктивной системе.

Дополнительная информация

Иммуногистохимическое исследование в настоящее время является наиболее точным методом диагностики опухолевых заболеваний. Оно позволяет с точностью до 99% поставить окончательный диагноз, определить вид опухоли, выявить ее первичную локализацию.

Иммуногистохимическое исследование эндометрия

Такой анализ проводится, если:

  • Часто наблюдаются выкидыши.
  • У женщины было несколько неудачных попыток ЭКО.
  • Диагностирована хроническая форма эндометрита.

Данное исследование помогает выяснить, имеются ли клетки, мешающие зачатию естественным путем.

ИГХ-исследование тканей эндометрия назначается женщинам, у которых уже было несколько неудачных попыток искусственного оплодотворения.

Взятие тканей эндометрия проводится в разные дни цикла, которые назначает врач.

Источник: https://kono-pizza.ru/tsitologiya/tsitologicheskoe-gistologicheskoe-immunogistokhimicheskoe-issledovanie/

Иммуногистохимическое исследование клинического материала (с использованием 1 антитела)

Цитологическое гистологическое иммуногистохимическое исследование

[12-027] Иммуногистохимическое исследование клинического материала (с использованием 1 антитела)

3300 руб.

Исследование клеток ткани, которое проводится с помощью специальных реактивов. 

Синонимы русские

ИГХ, иммуногистохимия, иммуногистохимический анализ.

Синонимы английские

Immunohistochemistry, IHС, immunohistochemical analysis.

Метод исследования

Иммуногистохимический метод.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Образец ткани / образец ткани в парафиновом блоке.

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Специальной подготовки не требуется.

Общая информация об исследовании

Иммуногистохимическое исследование клинического материала проводится в целях выявления в нем искомых веществ.

Готовые гистологические препараты обрабатываются специальными реактивами, содержащими меченые специфические антитела к выявляемому веществу, которое в данной ситуации служит антигеном.

Если искомое вещество находится в исследуемом материале, то антитело связывается с его определенными участками. В результате этого между ними образуется комплекс и происходит окрашивание ткани.

Данный метод используется в диагностике различных патологических состояний, особенно велика его роль в области онкологии.

Иммуногистохимическое (ИГХ) исследование помогает не только диагностировать опухоль, определить ее нозологический вариант, выявить первичный опухолевый очаг и обнаружить раковое перерождение клеток, но также спрогнозировать варианты течения заболевания и успешность лечения. К факторам, влияющим на прогноз, относятся рецепторы к эстрогенам и к прогестерону, Ki-67 (маркер активности опухоли), her-2 neu (эпидермальный фактор роста, определяет чувствительность опухоли к химиопрепарату трастузумабу/герцептину), VEGF (сосудистый фактор роста), Bcl-2, р53 и др. В отличие от иммуногистохимического анализа, их невозможно определить при обычном гистологическом исследовании.

Также этот метод нашел применение в диагностике системных заболеваний соединительной ткани и болезней почек, позволяет выявлять бактерии и вирусы в изучаемых тканях, например вирус Эпштейна – Барр, папиллома-вирус, Helicobacter Pylori (у больных хроническим гастритом), микобактерии при диагностике туберкулеза и др.

На основе ИГХ-анализа врач получает заключение с положительными и отрицательными маркерами, и это помогает подтвердить или опровергнуть гипотезу других клинико-лабораторных исследований.

Рак шейки матки относится к наиболее распространенным видам рака у женщин. Эпидемиологические и лабораторные данные подтверждают роль человеческого папиллома-вируса (ВПЧ, HPV) в качестве запускающего агента для подавляющего большинства предраковых и злокачественных поражений эпителия слизистой оболочки шейки матки. При этом ДНК ВПЧ могут быть обнаружены в 95-100% всех случаев.

Вирус папилломы человека представляет собой небольшие циркулярные двухцепочечные вирусы дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК), принадлежащие к семейству Papillomaviridae. Известно более 130 типов ВПЧ. Они классифицируются по степени риска, основанного на их связи с цервикальной карциномой.

ВПЧ 16 и 18 являются наиболее часто встречающимися типами высокого риска. Внедряясь в эпителиальные клетки, вирус вызывает в них дефекты генов, тем самым способствуя развитию опухоли.

При помощи ИХГ легко обнаружить в клетках, пораженных HPV, экспрессию белков p16 и p18, и их позитивность сильно коррелирует с позитивностью HPV.

Это помогает различить неопухолевую дисплазию (как результат воспаления) и опухолевую (вызванную вирусом папилломы и способную переродиться в рак), а также позволяет провести дифференциальную диагностику дисплазии умеренной и высокой степени тяжести (CIN II/III) и начальных форм рака шейки матки, выявление поражений, склонных к прогрессированию и развитию инвазивной карциномы. В дисплазиях умеренной и высокой степени (в 80-100% случаев CIN II и практически во всех случаях CIN III) и инвазивном раке шейки матки определяется усиленная экспрессия белка p16, и она усиливается по мере нарастания тяжести поражения.

У женщин с плоскоклеточными интраэпителиальными поражениями низкой степени тяжести очаговая и диффузная экспрессия свидетельствует о прогрессировании заболевания. Отсутствие или очаговая экспрессия p16 в поражениях высокой степени может служить дополнительным признаком благоприятного течения патологического процесса.

Применяется иммуногистохимическое исследование и при дифференциальной диагностике целиакии.

Целиакия – это системное заболевание, обусловленное генетической непереносимостью глютена или соответствующих проламинов, которые содержатся в семенах злаков.

Характеризуется данная патология повреждением слизистой оболочки тонкой кишки (развитием атрофической энтеропатии), появлением в сыворотке крови специфических антител и широким спектром глютензависимых клинических проявлений.

Заболевание встречается в два раза чаще среди женщин, чем среди мужчин, может впервые проявиться как в детстве, так и у взрослых. Целиакия может протекать с ярко выраженной или со стертой клинической картиной, а также без гастроэнтерологической симптоматики.

Чаще всего встречается стертый вариант течения заболевания, поэтому диагностика глютеновой энтеропатии (ГЭ) затруднена.
На первичном лабораторном этапе проводится серологическое исследование, определяющее в крови специфические биомаркеры. Лицам с положительными результатами показана эндоскопия тонкой кишки с биопсией и последующим гистологическим и ИГХ анализом взятого материала.

Известно, что целиакия сопровождается повышением числа лимфоцитов внутри эпителиальных клеток тонкой кишки. При этом отличительной особенностью является то, что большинство интраэпитиальных лимфоцитов (ИЭЛ) несут на своей поверхности специфический Т-клеточный рецептор (CD3 γ и CD3δ-положительные клетки).

Чем активнее протекает заболевание, тем больше ИЭЛ. Эта особенность используется при проведении иммуногистохимического исследования, позволяющего определить преобладающий тип лимфоцитов.

Особенно важен этот анализ, когда существует расхождение между данными серологического исследования и гистологической оценкой на стандартных участках.

Для чего используется исследование?

  • Для определения вида и подвида опухоли, степени ее злокачественности и распространенности онкологического процесса;
  • для дифференциальной диагностики пролиферативных заболеваний;
  • для определения этиологического фактора, вызвавшего изменения в клетках;
  • для подбора эффективной терапии;
  • для оценки пролиферативной активности клеток опухоли;
  • для оценки эффективности лечения;
  • для диагностики рецепторного статуса при онкологическом заболевании (например, раке молочной железы, предстательной железы);
  • для определения первичного очага опухоли;
  • для выявления злокачественного потенциала пораженных клеток;
  • для первичного отбора пациентов для диспансерного учета и дальнейшего обследования;

Когда назначается исследование?

  • При дифференциальной диагностике дисплазии (высокой и умеренной степени) и начальной стадии рака шейки матки;
  • при раке молочной железы, желудка, предстательной железы в целях определения чувствительности к различным видам терапии;
  • при определении степени злокачественности и оценки прогноза заболевания;
  • при оценке эффективности терапии;
  • при поиске источника метастазов;
  • при диагностике гастроинтестинальных стромальных опухолей (GIST) с помощью расширенной панели антител, включающей DOG1;
  • при диагностике нейроэндокринных опухолей;
  • при дифференциальной диагностике целиакии, сопровождающейся неясной гистологической картиной;
  • при расхождении результатов серологического исследования и гистологической оценки.

Что означают результаты?

Референсные значения

Диапазон значений индивидуален для каждого заболевания, зависит от используемых антител.

Расшифровка результатов исследования содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом.

Проводится морфологическая оценка препарата (опухоли классифицируются согласно ВОЗ), дается описательный ответ с указанием оценки экспрессии антитела. ИХГ всегда следует использовать в качестве дополнения к морфологическому исследованию, результаты не следует интерпретировать изолированно.

Что может влиять на результат?

При некоторых заболеваниях есть факторы, которые могут влиять на результат. Так, при диагностике целиакии назначение безглютеновой диеты до исследования может приводить к получению ложноотрицательного результата.

Также рекомендуется

Кто назначает исследование?

Онколог, гинеколог, гастроэнтеролог, терапевт, педиатр.

Литература

  • Далленбах-Хеллвег Г., Трунк М.Й., Кнебель Дебериц М. Традиционные и новые молекулярные методы для ранней детекции рака шейки матки//Архив патологии 2004 – №5 – с. 35-39.
  • Brunner M, Koperek O, Wrba F, Erovic BM, Heiduschka G, Schoppper C, et al. HPV infection and p16 expression in carcinomas of the minor salivary glands. Eur Arch Otorhinolaryngol. 2012;269:2265–9.
  • Galgano MT, Castle PE, Atkins KA, Brix WK, Nassau SR, Stoler MH. Using biomarkers as objective standards in the diagnosis of cervical biopsies. Am J Surg Pathol. 2010;34:1077–87.
  • McCluggage WG. Immunohistochemistry as a diagnostic aid in cervical pathology. Pathology. 2007;39(1):97–111.

Источник: https://helix.ru/kb/item/12-027

Гистология и иммуногистохимия

Цитологическое гистологическое иммуногистохимическое исследование

Очень много вопросов мне задают больные и их родственники относительно такой, казалось бы, простой, вещи – как гистологическое исследование (гистология) и иммуногистохимическое исследование (иммуногистохимия, ИГХ).

Ответить на некоторые их этих вопросов – и есть цель этой статьи. Прошу моих более искушенных читателей извинить меня за некоторые упрощения, допущенные при написании данного материала, мое желание при этом было одно – обеспечить максимальную доступность текста широкому кругу непосвященных людей.

Гистологическое исследование —  исследование любой ткани, которая была взята в процессе (как правило) биопсии у человека. Гистологическое исследование, наряду с иммуногистохимическим исследованием –  самое важное исследование в диагностике новообразования пациента и крайне необходимо для назначения дальнейшего лечения.

Без гистологического анализа (или без иммуногистохимического анализа) патологической ткани однозначно поставить пациенту  диагноз – злокачественное новообразование – невозможно, несмотря на имеющиеся у врача-онколога данные различных иных анализов и исследований.

Гистологическое исследование выполняет специальный врач – специалист по патоморфологии, ткань исследуется с помощью микроскопа.  Исследованию подвергается биопсийный, либо, непосредственно,  операционный материал.

Само исследование может быть срочным – обычно такое происходит, когда пациента оперируют, даже и по другому поводу, и занимает минут 30 (с последующим обязательным пересмотром) и плановое  – до 10 дней.

Точность гистологического исследования сильно зависит от того, насколько качественно взят материал, как качественно работает сама лаборатория, насколько высока квалификация врача, проводящего это исследование.

Именно поэтому бывает так, что при пересмотре гистологии результаты отличаются. Поэтому пересматривать препараты можно, а иногда и просто необходимо.

Что же такое  – биопсия

Биопсия (от латинского “био” – жизнь и “опсия” – смотрю) – это  взятие (из живого организма) тканей для дальнейшего  их микроскопического исследования после окраски специальными красителями. Биопсия  при большинстве онкологических заболеваний – обязательный метод исследования для  постановки  диагноза.

Биопсийный материал берется разными способами – с помощью специальной иглы, отщипыванием кусочка ткани, исследуются промывочные воды и т.п.

Само взятие биопсийного материала, как правило, безболезненно. Неприятен, зачастую, процесс взятия – это сопряжено с трудностями доступа к некоторым новообразованиям.

В ряде случаев, в процессе биопсии применим наркоз, во многих случаях биопсия делается

под инструментальным (например – УЗИ) контролем. 

Бывает, что сразу требуется и удаление имеющегося новообразования и биопсия сразу – и исследование и лечение  (скажем, при удалении полипа с целью исследования таким

образом происходит и излечение).

Иммуногистохимия (ИГХ) – метод идентификации специфичных антигенных свойств злокачественных новообразований. 

Иммуногистохимическое исследование –  отличная и достаточно современная методика  дифференциальной диагностики злокачественных новообразований. ИГХ позволит исследователю  определить гистогенез опухоли на клеточном уровне.

Иммуногистохимия позволит  оценить темп роста клеток опухоли, прогноз, реакция на химиотерапию, возможность  гормонального лечения, ответ опухоли на так нызываемые таргетные препараты.

С помощью ИГХ определяют:

•        наличие рецепторов стероидных гормонов (прогестерона и эстрогена при РМЖ);

•        экспрессию  HER-2/neu в клетках при  РМЖ;

•        производится иммунодиагностика лимфопролиферативных процессов (определяются ходжкинские и неходжкинские лимфомы);

•        гистогенетическую принадлежность метастатических опухолей (когда первичный очаг новообразования не определен);

•        гистогенетическую принадлежность неклассифицируемых опухолей.

Для ИГХ  возможно  использовать с всежие срезы,и  приготовленные из парафиновых блоков  много лет назад.

При ИГХ исследовании недифференцированных опухолей удается установить их тканевую или даже органную принадлежность, это позволит подтвердить или опровергнуть  метастатический характер исследуемой опухоли новообразования и  выявить первичную опухоль.

Несмотря на то, что ИГХ более информативна, чем гистология, в ряде случаев необходимо именно гистологическое исследование. Так, например, иммуногистохимия не поможет отличить меланому от невуса, так как они будут окрашиваться одинаково, зато с этой задачей прекрасно справится гистологический анализ.

Диагноз: c-r правосторонный . T2N0M0

Иследовано 15 фрагментов ткани молочной железы:

  • 10 из них дукталная карцинома insitu, солидного и криброформного типа, G2 , максимальной протяжёностью 9 мм: выявляются фокусы инвазивного неспецифицированного рака: строма с выраженным склерозом, местами с диффузной лимфоидной инфилтрацией по переферии инвазивного компонента, формированием лимфоидных фолликулов.  
  • 5 фрагментов – ткань молочной железы с аденозом. По данному материалу стадирование онкопроцесса не представляется возможным.

А вот результат иммуногистохимии этого же новообразования в груди.

Иследовано 15 фрагментов ткани молочной железы: инвазивный неспецифицированный рак правой молочной железы G 2 (3+2+1=6б) по Elton&Ellis.  Протяженность 9 мм, опухолевые клетки в краях резекции, при окрашивании SMM отсутствие миоэпителия.  Внутрипротоковый компонент солидного и криброформного типа, G2. Строма с выраженным склерозом, местами с диффузной лимфоидных фолликулов.

5 фрагментов – ткань молочной железы с аденозом. По данному материалу стадирование онкопроцесса не представляется возможным.

ИГХ исследование на  HER2 – слабое неполное мембранное окрашивание более 10%.  Инвазивных опухолевых клеток -2б сверхэкспрессия  HER2 / neu не определена. ИГХ исследование на ЕR-30%. Инвазивного компонента 3б+2б=5б. ИГХ исследование на PR-15%- Инвазивного компонента 3б+2б=5б . ИГХ исследование на Ki-67-20%.

Обобщенно, ИГХ дает нам следующее –

Герцепт – статус  – отрицательный, т.е. лечение Герцептином не показано.

Выявлена чувствительность опухоли к эстрогену и прогестерону, что дает возможность назначить тамоксифен или ингибиторы ароматазы.

Инвазивный компонент указывается в баллах. В данном случае 5б – на границе с низкой и средней степенью злокачественности.

Показатель G указывает на степень дифференцированности опухолевых клеток. В данном случае G2 – средняя степень.

Ki-67- говоря по простому, показывает, насколько агрессивен рост опухоли. До 15% – низкоагрессивная, 30% и более – высокоагрессивная.

Иными словами, данное новообразование возможно лечить гормональными препаратами и химиотерапией, но оно не поддается лечению Трастузумабом.

При таком раскладе, прогноз, в общем, благоприятный.

Таким образом – гистологическое исследование и иммуногистохимическое исследование являются высокоинформативными и крайне необходимыми при подозрении на наличие злокачественного новообразования,  отказываться от проведения данного исследования нельзя.

Источник: https://www.onkolog-rf.ru/gistologiia-immunogistokhimiia

Морфологическая диагностика, как фактор повышения эффективности лечения рака

Цитологическое гистологическое иммуногистохимическое исследование

Эффективность лечения рака зависит не только от развития методов терапии – без постановки точного морфологического диагноза врач-онколог не может выбрать подходящий для конкретной опухоли вид лечения.

Важным компонентом современной онкологической помощи, который, к сожалению, часто остается в тени достижений технологий разрушения опухолей, является правильная постановка диагноза. А точнее – определение типа опухолевых клеток и, соответственно, их устойчивости к различным видам внешнего воздействия.

Решает эту задачу морфологическая диагностика, базовый принцип которой – исследование образцов опухолевых клеток.

С каким образцами опухолевых клеток работает патоморфология?

Базой для морфологической диагностики являются образцы тканей (фрагменты опухолей).

Наиболее частым способом забора материала является трепан-биопсия, которая осуществляется при помощи специальной толстой иглы, также используется инцизионная биопсия, которая выполняется при помощи скальпеля и эксцизионная биопсия с тотальным забором пораженного участка (например, биопсия лимфоузла при диагностике лимфом).

После образцы тканей проходят этапы специальной подготовки (фиксации и проводки), после чего пропитываются парафином с формированием блока. Из блоков на специальных устройствах (микротомах) приготавливаются тонкие срезы толщиной 4-5 микрон. Полученные срезы помещаются на стекла, подвергающиеся различным методам окраски с целью выделения различий в клеточных структурах. Эти, так называемые, “стекла”, подлежат тщательному рассмотрению врачом-патоморфологом.

Каждый из этапов подготовки образцов критичен для возможности и точности последующих молекулярных методов исследования, поэтому нарушение технологии подготовки может привезти к неправильному назначению лечения.

Зачем изучать опухоли под микроскопом?

Количество известных разновидностей опухолей – велико. Наиболее полной считается классификация Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ), которая в печатном виде представляет собой 11 томов, около 400 страниц в каждом. Итог – ошибки в постановке диагноза неизбежны.

Патоморфологическая классификация опухолей Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) едва уместилась в 11 томов

Показатель ошибок при постановке диагноза поражает: от 5 до 50% всех онкологических диагнозов в мире – неверны.

Половина этих ошибок не становятся фатальными – различные виды рака могут одинаково реагировать на определенный подход к лечению.

Но значительная часть  неточностей приводит к неадекватному лечению рака у пациентов, которое может способствовать прогрессированию заболевания.

Среди объективных причин ошибочных диагнозов, связанных с морфологической диагностикой, лидирует невозможность получения образца опухолевой ткани для ее морфологического исследования ввиду трудности доступа либо тяжелого состояния пациента.

Среди субъективных причин ошибок морфологической диагностики наиболее распространены:

  1. ошибка при заборе материала (например, при раке простаты следует проводить множественный забор образцов, т.к. опухоль в этом органе может иметь крайне сложную пространственную форму);
  2. отсутствие возможности конкретного лечебного учреждения провести морфологическую диагностику в необходимом объеме (собственная морфологическая лаборатория – это сложный и дорогой институт);
  3. нарушения протоколов как в части отказа от забора и морфологического исследования образцов, так и в части стандартов проведения морфологической диагностики опухоли (в том числе и устаревшие методики, отсутствие необходимого оборудования, низкая квалификация специалистов, на повышение которой не выделяется средств).

И только морфологическая диагностика, проведенная с соблюдением всех стандартов взятия материала, подготовки и рассмотрения образцов, способна дать окончательный ответ о типе опухоли и ее особенностях.

Гистология и иммуногистохимия – в чем отличие?

Первоначально, морфологическая диагностика решала задачу определения наличия злокачественного процесса в ткани. Для этого применялся метод, который в современной медицине называется “гистологическое морфологическое исследование”, или, как часто можно услышать от пациентов “гистология”.

С помощью гистологического морфологического исследования может быть проведена дифференциальная диагностика доброкачественных процессов и злокачественной опухоли – т.е. определение наличия измененных (атипичных) клеток в образце тканей.

Простое гистологическое исследование в любом случае носит субъективный характер и зависит от профессионализма проводящего его врача.

Поэтому, при подозрении на наличие опухоли, второе мнение от ведущих экспертов МИБС в этой области значительно снижает риск ошибочного диагноза.

При подтверждении опухолевого процесса в тканях, пациенту требуется более точная диагностика, которая точно определит тип опухоли и укажет на наиболее эффективный подход к ее лечению – иммуногистохимия.

Зачем нужно иммуногистохимическое исследование?

Основой иммуногистохимии является окрашивание клеток специфическими веществами, которые реагируют на определенные типы опухолевых клеток и “мишени”, специфические свойства и мутации генов конкретного типа рака.

Пример иммуногистохимии в МИБС: Позитивная реакция на СК14 (коричневое окрашивание) вокруг всех подозрительных структур исключает рак молочной железы – дополнительное лечение пациентке не требуется

Таким образом, иммуногистохимия позволяет точно указать нозологию (разновидность) опухоли, что чрезвычайно важно для проведения адекватного лечения, а также – для прогнозирования развития заболевания. Например, некоторые разновидности рака молочной железы (тубулярный, фиброматоз-подобный) не требуют иного лечения, кроме хирургического.

Иммуногистохимия в МИБС: Позитивная реакция на bcl10 в лимфоидных клетках конъюнктивы глаза (коричневое окрашивание вокруг фолликула) подтверждает диагноз MALT-лимфомы, при которой наибольшего эффекта покажет химиотерапия, а не хирургическое лечение

Лечим метастазы. Когда не обойтись без патоморфолога?

Метастазы представляют собой “копию” злокачественных клеток первичной опухоли, точнее, того типа тканей, из которых развилось новообразование. Поэтому тип клеток метастаза может указать на локализацию первичного рака.

Это крайне важно, если первичная опухоль не проявляет себя симптомами и не диагностирована. С другой стороны, если первичная опухоль, имеет уязвимость к препаратам таргетной терапии, то ее метастазы могут утратить это свойство.

В таком случае иммуногистохимия образца метастазов покажет, что для первичной опухоли лечение будет прежним, а вот для метастазов следует избрать другой подход.

Благодаря развитию методов молекулярной диагностики (иммуногистохимия, ПЦР, секвенирование), лекарственная терапия рака идет большими шагами вперед. Помимо химиотерапии, сейчас активно используются таргетные препараты, целенаправленно воздействующие на мишени в опухолевых клетках (HER2, CD20, c-kit, мутантный b-Raf и др.).

Кроме того, в настоящее время онкология переживает «бум» иммунотерапии, при применении которой лекарственные препараты разрывают порочный механизм, препятствующий уничтожению опухолей собственными иммунными клетками.

Однако для правильного назначения таких препаратов необходимым условием является  определение специфических маркеров при помощи иммуногистохимического или молекулярно-генетического исследования опухолевой ткани.

Более того, часто маркеры, указывающие на чувствительность к иммунотерапии (MMR, MSI), также говорят о том, что пациенту не следует назначать химиотерапию, в особенности это касается рака толстой кишки и желудка.

Иммуногистохимия показала, что негативная реакция на MSH2 (синее окрашивание ядер опухоли, коричневое окрашивание неопухолевой ткани) свидетельствует о том, что рак тела матки, представленный на данном слайде, чувствителен к иммунотерапии

Какой рак можно вылечить без операции?

Некоторые разновидности опухоли не только не требуют хирургического лечения, но оно им противопоказано, так как может привести к прогрессированию заболевания. Это прежде всего лимфома, опухоль, возникающая из лимфоцитов, которые располагаются как в лимфоузлах, так и в паренхиматозных органах.

Развитие иммуногистохимии и основанных на ее результатах таргетной терапии и иммунотерапии постоянно расширяют спектр видов рака, которые можно вылечить “точечным” воздействием исключительно на опухолевые клетки. Помимо лечения лимфомы, по состоянию на начало 2019 года наибольшее применение методы иммунотерапии и таргетного лечения получили при лечении таких заболеваний, как:

при которых современные протоколы лечения требуют выполнение иммуногистохимии. Большинство ошибок в диагностике и лечении данных заболеваний связано либо с не проведением иммуногистохимии, либо с ее неправильной интерпретацией.

Цена ошибки, к сожалению, может быть фатальной, так как назначение неправильного лечения может привести к резистентности (устойчивости) опухолевых клеток к лекарственным препаратам, которые при правильном назначении часто приводят к выздоровлению пациента.

Как повысить качество морфологической диагностики в клиниках России?

Выбирайте МИБС как для первого проведения базовой морфологической диагностики либо иммуногистохимического исследования, так и для получения второго мнения от ведущих специалистов нашей медицинской компании относительно имеющихся образцов ткани опухоли (часто называемого пациентами “пересмотр стёкол”), полученных при обследовании в другом онкоцентре.

Почему следует выбрать патоморфологическую лабораторию МИБС?

  1. исследование и оценка рассматриваемого материала проводится одновременно несколькими ведущими специалистами в центральной патоморфологической лаборатории МИБС в Санкт-Петербурге, сотрудничающей с федеральными онкологическими центрами.
  2. все вопросы логистики центр МИБС в вашем регионе берет на себя.
  3. МИБС владеет всеми технологиями, необходимыми для постановки правильного  патоморфологического диагноза. От вас не потребуется проводить дополнительные исследования в других лабораториях.
  4. Иммуногистохимическое исследование может быть проведено в полном объеме за счет средств ОМС (бесплатно для пациента) при наличии направления по форме 14у.

Как заказать морфологическое / иммуногистохимическое исследование в МИБС?

  1. позвоните в любой центр МИБС в вашем регионе;
  2. привезите материал (гистологические препараты, парафиновые блоки, копию выписки из истории болезни и прочие документы, описывающие характер заболевания) в центр МИБС вашего города;
  3. получите заключение через 3-10 дней (в зависимости от вида и объема исследования).

Источник: https://radiosurgery.ldc.ru/stati/morfologicheskaya-diagnostika-kak-faktor-povysheniya-effektivnosti-lecheniya-raka

Консультация доктора
Добавить комментарий